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1. 在无抗1生素的培养基中消化、计数和稀释细胞，稀释到常规细胞传代的浓度。

2. 分散细胞悬液到多孔培养板中，elisa***盒，或几个小培养瓶中。在一个浓度梯度范围内，把选择抗1生素加入到每一个孔中。例如，两1性霉1素B推荐下列浓度，0.25，0.50，1.0，2.0，4.0，8.0 mg/ml。

3. 每天观测细胞毒性指标，小鼠elisa***盒，如脱落，出现空泡，汇合度下降和变圆。

4. 确定抗1生素毒性水平后，使用低于毒性浓度2～3倍浓度的抗1生素的培养液培养细胞2～3代。

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【储存条件及有效期】

储存条件：2到8℃保存，避光。

有效期：12个月。

【自备仪器】

酶1标仪，移液器

【使用方法】

1、待样品孔中加完HRP结合物并温育一定时间后，elisa***盒厂家，洗板3-5次，每孔加入底物显色液A，显色液B各50 μL（A、B液先混合再加入孔中），轻轻混匀，国产elisa***盒，在37°C下温育10-30分钟。

2、每孔加入终止液，15 min内在450 nm波长处测定各孔溶液的OD值。

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两种多肽都释放进入血循环。两者来源相同并且等摩尔分泌。因此，从理论上讲，检测BNP和NT-proBNP的临床应用结果是相同的。而且从多年的临床结果来讲，也并不存在太大的区别。

在临床中，从心衰诊断这个角度来讲二者是没有区别的。但不存在差异是不可能的，以统计学来分析两者的差异很小。美国《临床化学》杂志在2007年发表了一篇论1文，题目是《BNP和NT-proBNP在急慢性HF中的诊断精1确性比较》，经过大量的文献统计得出如下结论：BNP和NT-proBNP化验在急性和慢性HF的诊断上具有较高的诊断精1确性并具有较高的相关性。

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